甾醇（Sterols）是一类广泛存在于动植物中的天然活性物质，包括胆固醇、植物甾醇（如β-谷甾醇、豆甾醇）等。它们在食品、药品、化妆品等领域具有重要应用价值，例如调节胆固醇代谢、抗氧化和抗炎等生物活性。随着健康意识提升，甾醇的检测需求日益增加，其组成分析和总量测定成为评价产品质量、功能特性及安全性的核心指标。准确检测甾醇的组成与含量，不仅有助于优化生产工艺，还能确保产品符合法规要求，为消费者提供科学依据。
甾醇的检测通常包含以下关键项目：
1. 总甾醇含量测定：通过定量分析样品中所有甾醇的总和，评估其营养价值或功能特性，常用于食用油、功能性食品的质量控制。
2. 甾醇组分分析：鉴别并量化不同甾醇种类（如β-谷甾醇、菜油甾醇等），用于植物来源鉴别或产品纯度评价。
3. 甾醇异构体检测：识别顺式/反式或位置异构体，避免加工过程中因高温或氧化导致的成分变化影响品质。
4. 氧化甾醇检测：监测甾醇氧化产物（如7-酮基胆固醇），作为食品安全和稳定性的重要指标。
甾醇检测需结合高效分析技术以实现精准测定：
1. 气相色谱法（GC）：通过衍生化处理后（如硅烷化），利用GC分离不同甾醇组分，配合氢火焰离子化检测器（FID）或质谱（MS）进行定性与定量分析。此方法灵敏度高，适用于复杂基质样品。
2. 高效液相色谱法（HPLC）：采用C18反相色谱柱，配合紫外（UV）或蒸发光散射检测器（ELSD），无需衍生即可分析甾醇，适合热不稳定化合物。
3. 质谱联用技术（GC-MS/LC-MS）：结合色谱分离与质谱的高选择性，可精准鉴别甾醇种类及痕量氧化产物，是研究级检测的金标准。
4. 紫外分光光度法：基于甾醇与特定试剂（如Liebermann-Burchard试剂）显色反应，通过吸光度测定总甾醇含量，适用于快速筛查。
5. 酶联免疫法（ELISA）：利用抗原-抗体特异性反应检测特定甾醇，具有高通量、低成本的优点，常用于大批量样本初筛。
甾醇检测需遵循标准化流程以确保结果可比性：
1. 国际标准：
- AOAC 994.10：食品中总甾醇的GC测定方法；
- ISO 12228:2023：动植物油脂中甾醇组成的GC-MS分析方法。
2. 国内标准：
- GB 5009.270-2016：食品安全国家标准中甾醇的GC检测；
- 《中国药典》2020版：规定植物药材中甾醇的HPLC测定方法。
3. 行业规范：化妆品原料中胆固醇的检测（如ISO 16128-2）、婴幼儿配方食品甾醇限量（GB 10765-2021）等均对检测方法提出具体要求。
典型检测流程包括：样品前处理（皂化提取、液液萃取）、纯化（固相萃取或薄层色谱）、仪器分析与数据解析。需注意：
- 皂化条件（温度、时间）影响甾醇回收率；
- 衍生化试剂的稳定性可能影响GC结果；
- 基质效应（如油脂干扰）需通过内标法校正。
